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1.名稱

1.1通用名稱：JY-Color-BAP系列骨源性堿性磷酸酶試劑盒

1.2骨源性堿性磷酸酶試劑盒分為成人型JY–Color–BAP–AB、小兒型JY–Color–BAP–NB兩種型號，反應(yīng)裝置有單人份、五人份兩種不同的規(guī)格

2.引言

在骨代謝中，骨形成和骨吸收是既對立又統(tǒng)一的矛盾共同體，任何一方的不正常都會導(dǎo)致骨代謝的不正常，影響骨的正常發(fā)育，引起骨疾病，如佝僂病、骨質(zhì)疏松、Paget`s病等等。反映骨形成的較為特異的生化指標(biāo)包括骨源性堿性磷酸酶、骨鈣素和I型膠原氨基末端肽等。

該項目通過半定量檢測人體血液中骨源性堿性磷酸酶催化活性，用以篩查或輔助診斷因鈣營養(yǎng)不良引起的骨鈣化障礙或其它原因引起的代謝性骨病。

3.原理

血液樣品經(jīng)親和膜滲濾裝置的血漿分離器分離出血漿，經(jīng)預(yù)處理，通過過渡墊到達反應(yīng)膜，BAP與膜上固定的結(jié)合蛋白發(fā)生親和反應(yīng)，被特異的結(jié)合在反應(yīng)膜上，經(jīng)洗滌去除其它組分，加入酶底物，BAP催化BCIP（5溴-4氯-3吲哚磷酸鹽）水解，產(chǎn)生的吲哚基使NBT（氯化硝基四氮唑蘭）還原而顯色，在一定范圍內(nèi)，BAP催化活性與色斑深度呈正比，對照標(biāo)準(zhǔn)比色板判讀結(jié)果。

4.組成

5.樣品采集和處理

5.1.樣品采集

5.2.采血可以進行指端、耳垂和腳后跟采血，采血時應(yīng)避免溶血，不能使用抗凝血

5.3.可以用血清或血漿

6.儀器

6.1.微量移液器（17ul，30ul）

6.2恒溫水浴箱

7.操作步驟

7.1從2~8℃貯存環(huán)境中取出試劑盒，平衡至室溫使用（通常需要30分鐘）；

提示：反應(yīng)裝置開封后有效期：2小時，試劑瓶開封后有效期：90天

7.2撕開反應(yīng)裝置鋁箔條，在反應(yīng)裝置血漿分離器的加樣孔中滴加2滴洗滌液，待滲入；

7.3用定量采血管取末梢血30ul（或者微量移液器取17ul血清），加到加樣孔中，待滲入；

提示：通常情況下，血液在 2~3 分鐘內(nèi)會完全滲入，如果滲入效果不好，用手按壓血漿分離器，幫助血液滲入。

7.4血液滲入后，再在加樣孔中滴加2滴洗滌液，待滲入；

提示：本品作人群普查時可在完成該步驟后，將反應(yīng)裝置放在潮濕的容器中密封保存，12小時內(nèi)集中顯色。

7.5從反應(yīng)裝置上取下血漿分離器，可以看見反應(yīng)滑板上的圓形反應(yīng)膜；

提示：若圓形反應(yīng)膜上有其他膜片（過渡墊），用鑷子輕輕夾走即可

7.6向反應(yīng)膜上滴加2滴洗滌液（成人型為終止液），待滲入；

提示：小兒型滴加2滴洗滌液，成人型滴加2滴終止液

7.7推動反應(yīng)滑板，使圓形反應(yīng)膜定位在反應(yīng)裝置圓孔中央；

7.8在圓形反應(yīng)膜中央滴加1滴顯色液，置37℃恒溫水浴箱內(nèi)反應(yīng)      分鐘；

提示：① 37℃指的是恒溫水浴箱內(nèi)的氣溫；

②顯色反應(yīng)時間在每批產(chǎn)品出廠前用質(zhì)控物校定，應(yīng)跟據(jù)說明書指定的時間內(nèi)進行，顯色反應(yīng)前，應(yīng)將試劑平衡至室溫。

7.9從恒溫水浴箱中取出反應(yīng)裝置，將反應(yīng)滑板推回原位，在圓形反應(yīng)膜中央滴加1滴終止液，待滲入，終止反應(yīng)；

7.1020分鐘內(nèi)，將結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)比色板對比，讀取測定結(jié)果；

提示：本品為一次性使用器具，請妥善處理使用后的物品。

7.11將未開封的反應(yīng)裝置和其他瓶裝液體放入試劑盒中，放置2~8℃貯存。

特別提示：試劑盒各組份要求使用同批號產(chǎn)品。

8.結(jié)果判讀

8.1對照標(biāo)準(zhǔn)比色板，讀取顏色最相近的測定結(jié)果

8.2標(biāo)準(zhǔn)比色板成人型和小兒型共用一套，比色板上ABAP代表成人型骨源性堿性磷酸酶，NBAP代表小兒型骨源性堿性磷酸酶；

8.3不同色標(biāo)之間相差25U/L。

9.技術(shù)參數(shù)

9.1肝膽ALP100U/L、腸ALP150U/L或胎盤ALP150U/L，對成人型骨源性堿性磷酸酶200U/L測定結(jié)果無可見干擾；

9.2肝膽ALP100U/L、腸ALP150U/L，對小兒型骨源性堿性磷酸酶200U/L測定結(jié)果無可見干擾。

9.3重復(fù)性：批內(nèi)重復(fù)性：≥90%；  批間重復(fù)性：≥80%。

9.4準(zhǔn)確性：測定結(jié)果與標(biāo)本標(biāo)示值對應(yīng)的比色板色標(biāo)比較，非逾值比例數(shù)應(yīng)≥90%

10.使用條件

   15℃～30℃，避免陽光直射。

11.貯存條件

   2℃～8℃，避光保存。

12.有效期

一年。

13.參考文獻

1.吳文苑骨型堿性磷酸酶的檢測方法和臨床應(yīng)用。國外醫(yī)學(xué)臨床生物化學(xué)與檢驗寫分冊。1999，20（2）：64~65。

2.王加義，文慶成。小兒佝僂病診斷用骨堿性磷酸酶試劑盒研制成功。中華兒科雜志 1994年9月第32卷第5期

3.Evaluation of a new method for separating bone-type alkaline phosphatase.Ann Clin Biochem.1990 Sep;27(Pt5):501-2

4.Quantification of bone alkaline phosphatase in serum by precipitation with wheat-germ lectin:a simplified method and its clinical plausibility,Clin Chem. 1986 Oct;32(10):1960-6

14.技術(shù)服務(wù)

有關(guān)產(chǎn)品技術(shù)咨詢和投訴，請與廠商客戶服務(wù)部聯(lián)系。